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【小鼠肥大細(xì)胞】傳代培養(yǎng)原理：傳代培養(yǎng)是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1：2或1：2以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)，**步也是制備細(xì)胞懸液，當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)成致密單層時(shí)，它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破壞。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA(乙二胺四乙酸鹽)的混合物，做為消化液。細(xì)胞培養(yǎng)是一種操作繁瑣而又要求十分嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)技術(shù)。要使細(xì)胞能在體外長(zhǎng)期生長(zhǎng)，必須滿足兩個(gè)基本要求：一是供給細(xì)胞存活所必需的條件，如適量的水、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長(zhǎng)因子、氧氣、適宜的溫度，注意外環(huán)境酸堿度和滲透壓的調(diào)節(jié)。二是嚴(yán)格控制無菌條件。
【小鼠肥大細(xì)胞】培養(yǎng)幾天換液:取決于細(xì)胞類型或者說生長(zhǎng)/新陳代謝的速度，一般哺乳動(dòng)物細(xì)胞在2-4天換液的比較常見
【小鼠肥大細(xì)胞】傳代培養(yǎng)的步驟:拿到的細(xì)胞，如果是凍存的，首先要復(fù)蘇，步驟是，取出立刻用37攝氏度水浴溶解，然后離心去凍存液，加入十倍體積的培養(yǎng)液，懸浮，離心去培養(yǎng)液，再加入培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶培養(yǎng)即可。關(guān)鍵是快速解凍。 傳代是細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)滿后，去培養(yǎng)液，胰酶消化使細(xì)胞脫壁，轉(zhuǎn)入離心管離心，去消化液，用培養(yǎng)液懸浮，取部分細(xì)胞懸液(按需要)接入新的培養(yǎng)瓶，加入足夠的培養(yǎng)液培養(yǎng)即可。
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